Trihibridno križanje i kromosomsko kartiranje

Kako bi se izbjegao manji broj rekombinantnih potomaka zbog dvostruke kromatidne izmjene potrebno je raditi trihibridno križanje, dakle pratiti nasljeđivanje tri vezana gena. Trihibridno križanje je vrlo važno u kromosomskom kartiranju i određivanju položaja gena na kromosomu.
Ako smo primjerice ustanovili da je poredak gena na kromosomu p, l i c tj. da je gen l u sredini, to možemo iskoristiti za detekciju dvostrukih kromatidnih izmjena.
Kada se dogodi dvostruka kromatidna izmjena gen koji se nalazi u sredini ulazi u novu kombinaciju zajedno s alelima koji se nalaze uzvodno i nizvodno. Uzvodno i nizvodno od gena l su regije kromosoma (1 i 2) u kojima se događaju jednostruke kromatidne izmjene. Ako se kromatidna izmjena dogodi istovremeno u regijama 1 i 2 radi se o dvostrukoj kromatidnoj izmjeni i u tom slučaju nema novih kombinacija alela za gene p i c. Međutim gen koji se nalazi u sredini (l), nakon dvostruke kromatidne izmjene ulazi u nove kombinacije zajedno s genima uzvodno i nizvodno od njega, p⁺lc⁺ ili pl⁺c (slika 5.10.) . Osim toga još nastaju i roditeljske gamete: p⁺l⁺c⁺, plc. Isto je objašnjeno na primjeru križanja dolje (b⁺n⁺t⁺ / bnt).

Uz pomoć trihibridnog križanja moguće je prepoznati fenotip potomaka (koje bismo inače u dihibridnom križanju mogli previdjeti) koji je posljedica dvostruke kromatidne izmjene, te ih pribrojiti ostalim rekombinantnim potomcima kako bismo dobili pravu učestalost rekombinacije između gena p i c (slika 5.10.). Dolje je prikazano kartiranje uz pomoć trihibridnog križanja.

Poredak gena              n⁺b⁺t⁺/nbt  ­                  objašnjenje na slici 5.10.